合肥巔峰生物蛋白酶K
重組蛋白酶K質量檢測報告及使用說明
產品簡介:
蛋白酶K是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,從林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中純化得到,用于生物樣品中蛋白質的一般降解。該酶有兩個ca2+結合位點,它們離酶的活性中心有一定距離,與催化機理并無直接關系。然而,如果從該酶中除去ca2+,由于出現遠程的結構變化,催化活性將喪失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染酸制品的蛋白質。蛋白酶K是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。在較廣的pH范圍內(pH 4-12.5)均有活性,在尿素和SDS中也較為穩定,還具有降解天然蛋白質的能力。
蛋白酶K的用途廣泛,主要的應用行業包括:醫療及基礎研究領域:基因診斷試劑盒;基因組DNA提取試劑盒、RNA提取試劑盒中去除DNA和RNA制備中的核酸酶;此外,還應用于:皮革工業(皮革軟化及精細化、脫毛和軟化、蠶絲脫膠)制備脈沖電泳的染色體DNA;提取組織中非蛋白成分時,降解含有蛋白質雜質;食品、釀造工業:肉類嫩化、酒類澄清;洗滌工業:酶洗衣粉、洗衣液等也有應用。
規格:100毫克普通裝或客戶定制
比活性值:38 U/mg蛋白
來源種屬:酵母菌
分子質量:28,650
貯存和使用
干粉條件下有效期為24個月,液態時—20℃保存12個月。客戶利用緩沖液溶解后,需要—20℃貯存。溶解后,最好分裝成若干份,方便使用,避免反復凍溶。如果需要在2-8℃環境下放置,超過三天,建議過濾除菌或加入抑菌劑如3%疊氮化鈉,防止微生物污染。
稀釋緩沖液
根據需要,利用20mM Tris-HCL 緩沖液(PH 7.5)溶解成20mg/ml的工作濃度。
質量說明
活性單位定義 |
37℃、PH7.5條件下,每分鐘可水解底物酪蛋白生成1μmol酪氨酸所需蛋白酶K的量,定義為一個單位。 |
脫氧核糖核酸酶殘留 |
以λDNA為底物,37℃消化4小時以上,未檢測到脫氧核糖核酸酶活性。
|
核糖核酸酶殘留 |
37℃消化12小時以上,未檢測到核糖核酸酶活性。 |
酶純度測定(SDS—PAGE)
結果:蛋白酶K純度超過99.2%(掃描SDS—PAGE膠)。
酶活性測定
蛋白酶K比活性值 |
||
產品來源 |
本產品 |
Sigma |
比活性值(U/mg) |
38 |
>30 |
酶穩定性測定(—20℃冷凍條件下,12個月的數據)
結果:干粉狀態正確儲存,一年內酶活性保持不變;溶解狀態酶活性一年內降低小于2%。
酶質檢結果(來自于某大型生物技術有限公司)
序號 |
檢驗項目 |
檢驗標準 |
是否合格(合格√) |
1 |
動物基因組提取(蛋白酶K濃度為20mg/ml) |
不影響動物基因組的有效提取 |
√ |
與不加蛋白酶K的樣品相比,能有效降解蛋白質 |
√ |
||
2 |
降解蛋白質能力 |
與15ugBSA37℃孵育1小時,BSA可有效降解 |
√ |
質檢結論:合格(√) 讓步放行( ) 需要復檢( ) 不合格( ) |
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